| Abstract (Polish): |
Celem pracy było zbadanie wpływu białka PDIA3 na odpowiedź raka płaskonabłonkowego (SCC) linii A431 na aktywną formę witaminy D - 1,25(OH)2D3. Badania zostały przeprowadzone na linii A431 płaskonabłonkowego raka skóry z lub bez delecji PDIA3 lub VDR. Przeprowadzono testy proliferacyjne (SRB), migracyjne (test zarastania rany) oraz zbadano rozkład faz cyklu komórkowego oraz wykonano analizę transkryptomiczną badanych linii komórkowych po traktowaniu 1,25(OH)2D3 [10-7 M] po 24h. Dane przeanalizowano przy pomocy narzędzi bioinformatycznych. Komórki pozbawione PDIA3 wykazały zwiększoną wrażliwość na 1,25(OH)2D3, co prowadziło do zmniejszenia ich proliferacji oraz migracji. Traktowanie 1,25(OH)2D3 zmieniło również profil ekspresji genów w komórkach A431ΔPDIA3 w porównaniu do komórek A431WT, wskazując na istnienie genów zależnych od PDIA3. Co ciekawe, klasyczne cele dla receptora witaminy D (VDR), tj. CAMP, TRPV6 były regulowane w różny sposób przez 1,25(OH)2D3 w komórkach delecją PDIA3. Delecja PDIA3 obniżyła ekspresję genów PTGS2,MMP12 i FOCAD zależną od 1,25(OH)2D3. Geny te zostały zidentyfikowane jako zależne od PDIA3. Knockout PDIA3 skutkował zmianą w ekspresji ponad 2000 genów oraz modulował proliferację, cykl komórkowy oraz mobilność komórek, sugerując ważną fizjologiczną rolę PDIA3 w komórkach. Traktowanie komórek 1,25(OH)2D3 zmieniło profil ekspresji genów w linii komórkowej z delecją PDIA3, w porównaniu do komórek typu dzikiego (WT), wskazując na istnienie efektów genomowych zależnych od obecności białka PDIA3. Dodatkowo, odpowiedź na 1,25(OH)2D3 w nowotworowych komórkach A431 różniła się od unieśmiertelnionych keratynocytów HaCaT, stosowanych jako kontrola nienowotworowa. Zarówno wyciszenie genu PDIA3 i traktowanie komórek 1,25(OH)2D3, przynajmniej częściowo odwraca ekspresję genów związanych z fenotypem nowotworowym komórek A431. Tak więc, ekspresja genu PDIA3 może być markerem procesy nowotworzenia, a białko PDIA3 jest ważnym modulatorem odpowiedzi genomowej na witaminę D. [ABSTRACT FROM AUTHOR] |
