Voluven treatment could induce NLRP3 inflammasome-mediated pyroptosis of bone marrow-derived macrophages.

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Title: Voluven treatment could induce NLRP3 inflammasome-mediated pyroptosis of bone marrow-derived macrophages.
Authors: Yi, Xiuna, Wang, Yongli, Zhang, Jianzhong, Huang, Shaoyan, Liu, Mingming mingmingliu1234@163.com
Source: Canadian Journal of Physiology & Pharmacology. 2022, Vol. 100 Issue 7, p621-628. 8p.
Subject Terms: *NLRP3 protein, *HYDROXYETHYL starch, *PYROPTOSIS, *FEMORAL vein, *POLYMERASE chain reaction
Abstract (English): The aim of this study was to investigate the influence of Voluven on the NLRP3 inflammasome-mediated pyroptosis in bone marrow-derived macrophage (BMDM). Separated BMDMs were cultured and treated with different concentration of Voluven (0, 0.1, and 0.5 µg) dissolved in 10 µL 0.9% NaCl solution for 24 h. Both wild-type and nucleotide-binding domain and leucine-rich repeat protein 3 (NLRP3)–/– C57BL/6J mice (n = 18) were intravenously injected with 0.2 mL of 0%, 5%, and 10% Voluven through femoral vein, respectively. Pyroptosis was inspected with flow cytometry. The mRNA levels of NLRP3 and caspase-1 were detected with quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). The levels of NLRP3, pro-caspase-1, and cleaved caspase-1 (p10) in serum were determined with Western blot. The expression of IL-17A in peripheral blood CD4+ T cells was analyzed with flow cytometry. The expression of cleaved caspase-1 (p10) in mice spleens was inspected with immunofluorescence. Compared with control group, the ratio of pyroptosis in all Voluven-treated groups rose significantly. The levels of NLRP3 and caspase-1 were increased after Voluven treatment. The expression of interleukin (IL)-17A in Voluven-treated CD4+ T cells was also increased, exhibiting a dose-dependent pattern. In wild-type mice, Voluven-treated mice had higher levels of IL-17A, NLRP3, and cleaved caspase-1 (p10) in a dose-dependent manner. The effects of Voluven were diminished in NLRP3–/– mice. [ABSTRACT FROM AUTHOR]
Abstract (French): Cette étude portait sur l'influence de Voluven sur la pyroptose médiée par l'inflammasome NLRP3 dans les macrophages dérivés de la moelle osseuse (MDMO). Nous avons isolé et cultivé des MDMO, que nous avons exposés à différentes concentrations de Voluven (0, 0,1, 0,5 µg) dissous dans 10 µl de solution saline à 0,9 % pendant 24 h. Nous avons injecté 0,2 ml de Voluven à 0, 5 et 10 % dans une veine fémorale chez des souris NLRP3-/- C57BL/6J et de type sauvage (n = 18). Nous avons étudié la pyroptose à l'aide de la cytométrie en flux. Nous avons décelé les taux d'ARNm de NLRP3 et de caspase 1 à l'aide de la technique de PCR quantitative avec transcriptase inverse. Nous avons mesuré les taux sériques de NLRP3, de pro-caspase 1 et de caspase 1 clivée (p10) à l'aide de l'immunobuvardage de Western. Nous avons étudié l'expression de l'IL-17A dans les lymphocytes T CD4+ en circulation à l'aide de la cytométrie en flux. Nous avons étudié l'expression de la caspase 1 clivée (p10) dans les rates de souris à l'aide de l'immunofluorescence. Nous avons observé une augmentation nettement plus marquée du ratio de pyroptose dans les groupes exposés à Voluven que chez les témoins. Les taux de NLRP3 et de caspase 1 augmentaient après l'administration de Voluven. L'expression de l'IL-17A augmentait aussi dans les lymphocytes T CD4+ exposés à Voluven, et ce, de manière proportionnelle à la dose. Chez les souris de type sauvage exposées à Voluven, les taux d'IL-17A, de NLRP3 et de caspase 1 clivée (p10) augmentaient de manière proportionnelle à la dose. Les effets de Voluven ont diminué chez les souris NLRP3-/-. [Traduit par la Rédaction] [ABSTRACT FROM AUTHOR]
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ISSN:00084212
DOI:10.1139/cjpp-2021-0738
Published in:Canadian Journal of Physiology & Pharmacology
Language:English